《圣母在上》第四季的故事立足于莉莉安女子学园的悠久传统。在这所校园里，二年级的学姐会为一年级新生担任“姐姐”，不仅在学习上予以指导，更在生活中悉心照料，这种一对一的监护制度不仅帮助新生快速适应环境，也加深了不同年级学生之间的羁绊。全作以身为一年级新生的主角福泽佑巳为核心，她偶然邂逅了令全校学生憧憬的红蔷薇花蕾——二年级的小笠原祥子。两人在跨越重重障碍与考验后，最终缔结了神圣的「姊妹」契约。自此，温馨动人的故事便围绕着学生会「山百合会」的成员与同学们徐徐展开。第四季的动画内容将紧密衔接第三季的结局，忠实于原作小说的剧情走向，继续为观众呈现莉莉安女子学园中那些细腻动人的少女群像。在配音阵容方面，本季迎来了令人瞩目的新声优加盟：井上麻里奈、川澄绫子与小山力也将分别为「内藤笙子」、「细川夕子」以及细川可南子的父亲献声。同时，原本为鸟居江利子配音的天生目仁美也将跨界担任新角色有马菜菜的配音工作，为新一季的故事注入更多鲜活的生命力。